A quantidade de células polifenólicas dos cotilédones das espécies de Theobroma variam extensivamente. Os compostos polifenólicos destas células além da função de proteção participam no desenvolvimento do aroma do chocolate. A morfologia das células polifenólicas do mesofilo é descrita e também é analisado o desenvolvimento dos idioblastos em T. cacao L., T. subincanum Mart., T. obovatum Klotzsch ex Bernoulli, T. grandiflorum (Willd. ex Spreng.) K. Schum., T. microcarpum Mart., T. bicolor Bonpl. e T. speciosum Willd. ex Spreng. A quantidade de polifenóis totais determinada por espectrofotometria apresentou uma grande variação, cerca de 40 vezes entre T. cacao (variedade forastero). As células polifenólicas apresentam-se transparentes e dispersas pelo mesofilo cotiledonar. Em T. cacao e T. grandiflorum grande número de células estão alinhadas perpendicularmente à borda do mesofilo e apresentam coloração púrpura translúcida. Entretanto, em todas as espécies as células polifenólicas também associam-se ao feixe vascular. Nas espécies T. bicolor e T. speciosum, com baixo conteúdo polifenólico, estão localizadas apenas na região do feixe vascular. À microscopia eletrônica de varredura, as células polifenólicas apresentam uma complexa citoarquitetura e após a fixação em glutaraldeído, a secreção polifenólica exibe um só conteúdo ou fragmenta-se em várias gotas esféricas. À microscopia eletrônica de transmissão aparecem nas células jovens do mesofilo, plastídeos imaturos eletrondensos, semelhantes a substâncias polifenólicas sugerindo que em Theobroma os plastídeos estão envolvidos na síntese de polifenóis.

The amount of cotyledon polyphenolic cells varies extensively within the Theobroma species. The polyphenolic compounds of these cells play a protective role and furthermore have an important function in the development of chocolate flavour. The morphology of the polyphenolic cells of the mesophyll is described and the development of these idioblasts in Theobroma cacao L., T. subincanum Mart., T. obovatum Klotzsch ex Bernoulli, T. grandiflorum (Willd. ex Spreng.) K. Schum., T. microcarpum Mart., T. bicolor Bonpl. and T. speciosum Willd. ex Spreng analysed. The total polyphenolic content in the seeds as determined by spectrophotometry showed a variation of about forty times. The alive, transparent polyphenolic cells are scattered throughout the cotiledonary mesophyll. However the polyphenolic cells of T. cacao and T. grandiflorum are also aligned perpendicularly with respect to the mesophyll borders and, in addition, both species display polyphenolic cells with a natural translucent purple colour. All the species analysed contained polyphenolic cells scattered throughout the parenchymal cells and also in a lengthwise association with vascular bundles. In T. bicolor and T. speciosum, the species with the lowest polyphenolic contents, these cells were mostly located around the vascular bundles. Using Scanning Electron Microscopy, the polyphenolic cells demonstrated a complex cytoarchitecture, and after fixing with glutaraldhyde, the polyphenolic secretion was shown to remain as a single unit or was organized into round droplets. Transmission Electron Microscopy displayed immature plastids from young mesophyll cells containing eletron-dense deposits similar to phenolic substances, suggesting that Theobroma plastids are involved in the synthesis of phenolics.

As células do mesofilo cotiledonar e respectivas sínteses lípide-protéicas de Theobroma grandiflorum, T. subincanum e T. bicolor são analisadas e comparadas ao T. cacao. As espécies mencionadas possuem os cotilédones foliáceos e redobrados em torno do eixo hipocótilo-radicular, típicos de Sterculiaceae; o tamanho dos frutos e também a morfologia, o peso e as respectivas sementes são distintos entre as quatro espécies. As sementes de T. grandiflorum e T. bicolor medem 30 mm no eixo principal, enquanto em T. subincanum e T. cacao medem 17 mm e 6 mm, respectivamente e nesta mesma ordem pesam 11,6 g, 9,4 g, 2,1 g e 3,0 g. Os mesofilos cotiledonares contêm células com reservas polissacárides e lípide-proteicas. Theobroma cacao, T. grandiflorum e T. subincanum contêm acima de 50% de lipídeos. Nas quatro espécies, os glóbulos lipídicos acumulam-se gradualmente, adjacentes à parede celular e medem entre 1 a 3 µm. A microscopia eletrônica de transmissão mostrou a precipitação pouco densa das proteínas no vacúolo central das células jovens do mesofilo de T. cacao. Nas células maduras, a proteína de reserva está densamente entremeada por glóbulos lipídicos; poucos grãos de amido ocorrem no mesofilo cotiledonar destas quatro espécies. As células polifenólicas estão dispersas no mesofilo cotiledonar ou alinhadas próximas ao feixe vascular. As células imaturas demonstraram capacidade de síntese de todas as reservas, mas gradualmente as células predeterminadas, produzem principalmente reservas lípide-proteicas. Não obstante a característica única dos reconhecidos produtos de T. cacao, a capacidade de síntese lípide-proteica do T. grandiflorum, T. subincanum e T. bicolor sugerem novas possibilidades para a indústria de alimentos, produtos farmacêuticos e cosméticos.

Cotyledon mesophyll cell morphology and lipid and protein synthesis of T. grandiflorum, T. subincanum and T. bicolor were analyzed and compared with T. cacao. These species possess foliar cotyledons folded around the hypocotyl radicle axis, typical of Sterculiaceae. Fruit size, morphology and weight are very distinct amongst the four species and so are the respective seeds. The main axis of the T. grandiflorum and T. bicolor seeds measured about 30 mm, while T. subincanum and T. cacao seeds measured 17 mm and 26 mm respectively. The seed weights of T. grandiflorum, T. bicolor, T. subincanum and T. cacao were 11.6 g, 9.4 g, 2.1 g and 3.0 g, respectively. The cotyledon mesophylls of the four species contained mainly polysaccharides and lipid-protein reserve cells. Theobroma cacao, T. grandiflorum and T. subincanum were composed of greater than 50% lipids. For the four species, lipid globules gradually accumulated adjacent to the cell wall, and these globules measured from 1 to 3 µm. TEM showed low-density proteins inside the central vacuole of the young mesophyll cells of T. cacao. The protein reserves of the mature cells were densely scattered amongst the lipid bodies, and a few starch granules occurred together with the cotyledon mesophyll of the four species. Polyphenolic cells were found throughout the mesophyll cells or aligned with the respective vascular bundles. Immature cells demonstrated the capacity to synthesize all these reserves, but gradually the pre-determined cells produced mainly lipid-protein reserves. Besides the unique characteristics of the T. cacao products, the lipid-protein synthesis capacities of T. grandiflorum, T. subincanum and T. bicolor suggest various possibilities for new industrialized food, pharmaceutical and cosmetic products.

Foram analisadas amostras de água de irrigação e vegetais de hortas de Campinas, SP. A análise bacteriana condenou 22,3% das hortaliças e o exame parasitológico condenou 14,5%. O critério estabelecido pela legislação brasileira condenou 11,8% das amostras de água de irrigação. A contaminação de hortaliças por parasitas foi significantemente mais freqüente na estação chuvosa, enquanto o excesso de coliformes fecais foi mais freqüente na estação seca. O monitoramento adequado da água de irrigação é importante para evitar a contaminação de vegetais.

We examined samples of irrigation water and vegetables from kitchen gardens in Campinas, Brazil. The bacterial analysis condemned 22.3% of the vegetable samples, and the parasitological examination condemned 14.5%. The criteria established by the Brazilian legislation condemned 11.8% of the irrigation water samples. Parasites were significantly more frequent in vegetables in the rainy season, while excessive fecal coliforms were more frequent in the dry season. A proper monitoring of the irrigation water supply is important to avoid the contamination of vegetables.

Objetivou-se isolar e identificar a microbiota fúngica em ambientes considerados assépticos, através de exposições com meios de cultivo adequados, em três épocas distintas do ano, antes e imediatamente após as manobras técnicas realizadas em três áreas de trabalho: ambiente aberto, ambiente fechado sem filtração de ar e ambiente fechado com filtração de ar, utilizadas em produção de imunobiológicos. Os meios ágar-Sabouraud e ágar-soja, enriquecidos com 0,2% de extrato de levedura e sem cloranfenicol, foram estudados quanto à sua eficácia no isolamento de bolores e leveduras, considerando-se o número de colônias desenvolvidas e a freqüência dos diversos fungos isolados. Isolaram-se 67 espécimens, sendo 64 fungos filamentosos (bolores) e três leveduras. Dos bolores, 54 pertenciam a 22 gêneros da divisão Deuteromycota, famílias Moniliaceae e Dematiaceae, cinco amostras filamentosas foram incluídas na ordem Agonomycetales (Mycelia Sterilia), e uma amostra foi classificada na divisão Deuteromycota, ordem Sphaeropsidales, classe Coelomycetes. Da divisão Zygomycota, ordem Mucorales, família Mucoraceae, um único mucoráceo foi identificado até gênero. As três leveduras pertenciam também à divisão Deuteromycota (Fungi Imperfecti), família Cryptococcaceae, e foram identificadas como sendo duas Rhodotorula rubra e uma Torulopsis candida. Comprovou-se que o número de colônias isoladas aumentou após a realização das monobras técnicas e que a filtração de ar através de filtros tipo HEPA, reduzindo o número de colônias isoladas nos ambientes fechados, aumenta a segurança do trabalho; comumente é recomendada para áreas de atividade técnica cujos resultados satisfatórios estão diretamente relacionados com uma baixa incidência de contaminantes.

The isolation and identification of the fungic microbiota present in areas considered aseptic (open and/or restricted, with or without air filtration (HEPA filters) where production of immunobiologicals is carried out)were investigated Three exposures were made with appropriate culture media, in different seasons of the year, before and immediately after the performance of the technical work. Agar-Sabouraud and agar-soy media supplemented with 0.2% yeast extract and without chloranphenicol had their efficacy tests in isolating the filamentous fungia e (molds) and yeasts in the light of the number of cultures grown and the frequency exhibited by the various specimens isolated. Sixty-seven specimens (64 of filamentous fungiae (molds) and three yeasts) have been identified. Of the filamentous fungiae (molds), 54 belonged to 22 genera of the division Deuteromycota, families Moniliaceae and Dematiaceae, five were included in the order Agonomycetales (Mycelia Sterilia), and one was classified in the order Sphaeropsidales, class Coelomycetes. Of the division Zygomycota, order Mucorales, family Mucoraceae, only one specimen could be identified as to genus. The three yeasts, belonging also to the division Deuteromycota (Fungi Imperfecti), family Cryptococcaceae, were identified as two Rhodotorula rubra and one Torulopsis candida. It was demonstrated that the number of colonies isolated in the areas studied increased after the performance of technical maneuvers and that air filtration by means of HEPA filters, reducing to number of colonies isolated in restricted areas, increased safety and is consequently recommended for working areas where successful or unsuccessful results depend on a low incidence of contamination.

Objetivou-se isolar e identificar a microbiota fúngica em ambientes considerados assépticos, através de exposições com meios de cultivo adequados, em três épocas distintas do ano, antes e imediatamente após as manobras técnicas realizadas em três áreas de trabalho: ambiente aberto, ambiente fechado sem filtração de ar e ambiente fechado com filtração de ar, utilizadas em produção de imunobiológicos. Os meios ágar-Sabouraud e ágar-soja, enriquecidos com 0,2% de extrato de levedura e sem cloranfenicol, foram estudados quanto à sua eficácia no isolamento de bolores e leveduras, considerando-se o número de colônias desenvolvidas e a freqüência dos diversos fungos isolados. Isolaram-se 67 espécimens, sendo 64 fungos filamentosos (bolores) e três leveduras. Dos bolores, 54 pertenciam a 22 gêneros da divisão Deuteromycota, famílias Moniliaceae e Dematiaceae, cinco amostras filamentosas foram incluídas na ordem Agonomycetales (Mycelia Sterilia), e uma amostra foi classificada na divisão Deuteromycota, ordem Sphaeropsidales, classe Coelomycetes. Da divisão Zygomycota, ordem Mucorales, família Mucoraceae, um único mucoráceo foi identificado até gênero. As três leveduras pertenciam também à divisão Deuteromycota (Fungi Imperfecti), família Cryptococcaceae, e foram identificadas como sendo duas Rhodotorula rubra e uma Torulopsis candida. Comprovou-se que o número de colônias isoladas aumentou após a realização das monobras técnicas e que a filtração de ar através de filtros tipo HEPA, reduzindo o número de colônias isoladas nos ambientes fechados, aumenta a segurança do trabalho; comumente é recomendada para áreas de atividade técnica cujos resultados satisfatórios estão diretamente relacionados com uma baixa incidência de contaminantes.

The isolation and identification of the fungic microbiota present in areas considered aseptic (open and/or restricted, with or without air filtration (HEPA filters) where production of immunobiologicals is carried out)were investigated Three exposures were made with appropriate culture media, in different seasons of the year, before and immediately after the performance of the technical work. Agar-Sabouraud and agar-soy media supplemented with 0.2% yeast extract and without chloranphenicol had their efficacy tests in isolating the filamentous fungia e (molds) and yeasts in the light of the number of cultures grown and the frequency exhibited by the various specimens isolated. Sixty-seven specimens (64 of filamentous fungiae (molds) and three yeasts) have been identified. Of the filamentous fungiae (molds), 54 belonged to 22 genera of the division Deuteromycota, families Moniliaceae and Dematiaceae, five were included in the order Agonomycetales (Mycelia Sterilia), and one was classified in the order Sphaeropsidales, class Coelomycetes. Of the division Zygomycota, order Mucorales, family Mucoraceae, only one specimen could be identified as to genus. The three yeasts, belonging also to the division Deuteromycota (Fungi Imperfecti), family Cryptococcaceae, were identified as two Rhodotorula rubra and one Torulopsis candida. It was demonstrated that the number of colonies isolated in the areas studied increased after the performance of technical maneuvers and that air filtration by means of HEPA filters, reducing to number of colonies isolated in restricted areas, increased safety and is consequently recommended for working areas where successful or unsuccessful results depend on a low incidence of contamination.